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层析柜是一种高分离率、高灵敏度和高选择性的分离方法
更新时间:2024-02-02 点击次数:3658
  层析柜是一种用于分离和纯化样品的设备,它采用了层析技术,这是一种具有高分离率、高灵敏度和高选择性的分离方法。
 
  使用原理:
 
  生物分子间存在很多特异性的相互作用,它们之间都能够专一而可逆的结合,这种结合力就称为亲和力。亲和层析就是通过将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。被固定在基质上的分子称为配体,配体和基质是共价结合的,构成亲和层析的固定相,称为亲和吸附剂。亲和层析时首先选择与待分离的生物大分子有亲和力物质作为配体,并将配体共价结合在适当的不溶性基质上。将制备的亲和吸附剂装柱平衡,当样品溶液通过亲和层析柱的时候,待分离的生物分子就与配体发生特异性的结合,从而留在固定相上;而其它杂质不能与配体结合,仍在流动相中,并随洗脱液流出,这样层析柱中就只有待分离的生物分子。通过适当的洗脱液将其从配体上洗脱下来,就得到了纯化的待分离物质。
 
  设备结构:
 
  层析柜通常由以下几个部分组成:外壳、工作区域、控制系统等。外壳通常由金属或耐酸碱塑料制成,主要目的是保护工作区域,防止外界污染,并提供便于清洗和消毒的表面。工作区域通常由内衬不锈钢的工作面板、前玻璃门、风道系统和高效过滤器组成,风道系统和高效过滤器可过滤空气,并将洁净空气输送至工作区域,防止外部杂质进入。控制系统则由电子和机械部件组成,包括紫外线照射器、通风机和风量计等,可保证工作区域的负压状态,确保污染物向层析柜外部排放。
 
  操作步骤:
 
  层析柜的使用操作包括以下几个步骤:样品的准备和处理、层析柱的安装和平衡、上样和洗脱、收集和检测。在操作过程中,需要注意避免样品污染和交叉污染,同时要控制好流速和温度等参数,保证分离效果和实验结果的准确性。
 
  注意事项:
 
  层析柜在使用过程中需要注意以下几点:首先,要严格按照操作规程进行操作,避免人为失误导致的实验失败;其次,要保持设备的清洁和卫生,避免样品污染和交叉污染;第三,要定期对设备进行维护和保养,保证其正常运转和使用寿命;最后,要注意安全问题,如避免超压运行、避免使用未经批准的化学品等。

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