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冻干机在人工皮肤领域的应用
发布时间:2016-09-07 点击次数:1019
  
  
  皮肤是人体zui大的器官,是外源化学因素(化学品、药品等)或物理机械因素(紫外线)毒性作用的器官。传统的皮肤安全性评价实验不仅要求一定数量的动物,而且试验周期长,成本高。随着冻干技术的出现,利用冻干机制备人工皮肤的方法,该方法培养周期短,皮肤功能和活性在体外维持时间长。能满足毒性检验领域的需要。
  
  利用冻干机制备的人工皮肤可用于进行皮肤毒性测试是药品、食品添加剂及原料、农药、生物制品、化学品健康安全评价的常用检测项目。
  
  制作由胶原与细胞外基质混合物组成的复合胶原支架:
  
  1、在无菌条件下将胶原浸泡于冰冷-4'C、0.1%的醋酸溶液中,胶原浓度为8-10mg/Ml范围,调节PH值到7.2—7.3制备胶原溶液,操作应在4"进行;
  
  2、在胶原溶液中加入L)步骤所得的细胞外基质混合物,得到复合胶原溶液,复合胶原溶液中细胞外基质混合物与胶原的质量比例为2-2.5:7.5-8;
  
  3、取Lml制备好的复合胶原溶液置于孔径为3.5Cm的圆形模具中或6孔细胞培养板中,用0.Lml的1%—1.5%的戊二醛溶液4'C共价交联24士0.5小时,用0.1mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗2-3次,制成海绵状复合胶原基质;
  
  将复合胶原基质用波长254nm、36W的紫外线照射除菌后放置在低温冰箱冷冻过夜12-18小时,然后再在真空低温条件下,冻干机真空冷冻干燥24土1小时,即可得到制备复合胶原支架。

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